期刊简介
本刊系卫生部主管，中华预防医学会和江苏省血吸虫病防治研究所主办的全国血吸虫病（寄生虫病）专业性技术类科技期刊。1989年2月创刊，为双月刊，逢双月15日出版。办刊宗旨为贯彻预防为主方针，面向全国、面向基层、面向防治、促进血吸虫病（寄生虫病）防治事业发展，为进一步提高人民健康水平服务。
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- 杂志名称：中国血吸虫病防治杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,江苏省血吸虫病防治研究所
- 国际刊号：1005-6661
- 国内刊号：32-1374/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：第三届江苏省优秀期刊期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 农业与生物科学研究中心文摘, 医学文摘, 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
抗弓形虫主要表面抗原1单链抗体的筛选及鉴定
司进；朱荫昌；曹利民；王晓婷；梁幼生；管晓虹
关键词：弓形虫, 主要表面抗原1, 单链抗体, 靶向
摘要：目的采用重组抗原从人源化单链抗体库(Human single fold scFv library)中筛选和鉴定抗弓形虫主要表面抗原1(rSAG1)的单链抗体,对其特异性的弓形虫靶向作用进行分析,为弓形虫靶向生物治疗提供靶向分子.方法以重组SAG1融合蛋白作为包被抗原对噬菌体抗体库进行3轮固相筛选,获得抗rSAG1融合蛋白的阳性克隆;用纯化的原核表达载体pET-32C的亲和标签(Trx-His-Stag)、鼠可溶性抗原和大肠杆菌抗原对上述阳性克隆进行差异筛选,获得能特异性结合rSAG1的噬菌体克隆;差异筛选获得的特异性阳性克隆转染大肠杆菌HB2151进行诱导表达和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测,获得能分泌抗rSAG1单链抗体(anti-rSAG1 scFv)的阳性噬菌体克隆;DNA测序分析抗rSAG1的单链抗体基因序列.用Ni2+螯合柱亲和纯化rSAG1单链抗体,并用免疫印迹技术(Western blot)对纯化的抗rSAG1单链抗体进行免疫反应性检测;免疫组化检测rSAG1单链抗体对弓形虫速殖子的靶向作用.结果经过rSAG1抗原的固相筛选后获得24株阳性克隆,差异筛选后获得5株能特异性结合rSAG1的噬菌体克隆,其中有3株分泌性表达抗rSAG1的单链抗体,DNA测序和Genbank比对表明其为3株不同的抗弓形虫主要表面抗原1的单链抗体;West-ern blot表明亲和纯化的单链抗体能较好结合rSAG1;免疫组化显示抗rSAG1单链抗体可与弓形虫速殖子结合.结论利用噬菌体抗体库技术获得的特异性人源rSAG1单链抗体与弓形虫速殖子有较强的结合能力,这对弓形虫的靶向生物治疗具有潜在应用价值.
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