期刊简介
本刊系卫生部主管，中华预防医学会和江苏省血吸虫病防治研究所主办的全国血吸虫病（寄生虫病）专业性技术类科技期刊。1989年2月创刊，为双月刊，逢双月15日出版。办刊宗旨为贯彻预防为主方针，面向全国、面向基层、面向防治、促进血吸虫病（寄生虫病）防治事业发展，为进一步提高人民健康水平服务。
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- 杂志名称：中国血吸虫病防治杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,江苏省血吸虫病防治研究所
- 国际刊号：1005-6661
- 国内刊号：32-1374/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：第三届江苏省优秀期刊期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 农业与生物科学研究中心文摘, 医学文摘, 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
日本血吸虫信号传导蛋白14-3-3的制备及其特性分析
殷旭仁；余传信；谢曙英；钱春艳；宋丽君；王玠；张伟；许永良
关键词：日本血吸虫, 14-3-3蛋白, 基因克隆, 表达, 免疫特征
摘要：目的 制备可溶性重组日本血吸虫信号传导蛋白14-3-3( rSj14-3-3),并研究其免疫学特性.方法 采用反转录聚合酶链反应方法从日本血吸虫成虫mRNA中制备Sj14-3-3基因cDNA片段,将此cDNA片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-3的谷胱甘肽还原酶的基因下游,构建重组表达质粒Sj14-3-3/pGEX-4T-3.重组质粒转化大肠埃希菌BL21,转化子细菌采用异丙基-3-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)进行诱导,表达产物经SDS-PAGE以观察重组GST-Sj14-3-3表达情况.GST-rSj14-3-3经凝血酶消化后,经过Glutathione Sepharose-4B胶亲和层析制备纯化的rSj14-3-3.rSj14-3-3免疫家兔制备免疫兔血清,经免疫印迹试验分析rSj14-3-3免疫原性和反应性.结果 日本血吸虫江苏株Sj14-3-3蛋白基因编码序列被成功克隆,开放阅读框的DNA序列与基因库中的登录序列同源性为99.08％.构建的含Sj 14-3-3蛋白基因的重组表达质粒经IPTG诱导能表达分子量约为55 kDa的融合蛋白,融合蛋白经凝血酶切割和亲和层析获得纯化的rSj14-3-3.rSj14-3-3能诱导家兔产生高效价的特异性抗体,该抗体可识别重组和天然的14-3-3蛋白.结论 本研究成功制备了可溶性rSj14-3-3,其具有良好的免疫原性与反应性.
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