期刊简介
本刊系卫生部主管，中华预防医学会和江苏省血吸虫病防治研究所主办的全国血吸虫病（寄生虫病）专业性技术类科技期刊。1989年2月创刊，为双月刊，逢双月15日出版。办刊宗旨为贯彻预防为主方针，面向全国、面向基层、面向防治、促进血吸虫病（寄生虫病）防治事业发展，为进一步提高人民健康水平服务。
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- 杂志名称：中国血吸虫病防治杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,江苏省血吸虫病防治研究所
- 国际刊号：1005-6661
- 国内刊号：32-1374/R
- 出版周期：双月刊
期刊荣誉：第三届江苏省优秀期刊期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 农业与生物科学研究中心文摘, 医学文摘, 哥白尼索引(波兰), 文摘与引文数据库, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), CA 化学文摘(美), 万方收录(中), 上海图书馆馆藏, 国家图书馆馆藏, 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中)
pEGFP-N1-HBsAg-ROP2多基因重组表达质粒的构建及表达鉴定
马荣；肖婷；李瑾；孙慧；徐超；黄炳成；尹昆；赵桂华；崔勇；朱嵩；刘功振；闫歌；魏庆宽
关键词：弓形虫病, 乙型肝炎, pEGFP-N1, 乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg), 弓形虫棒状体蛋白2(ROP2), 质粒构建
摘要：目的 构建pEGFP-N1-HBsAg-ROP2重组质粒,并转染HEK293T细胞进行表达鉴定,为弓形虫病核酸疫苗的研制奠定基础.方法 根据HBsAg基因序列和pcDNA3-p30-ROP2重组质粒酶切位点设计引物,PCR扩增HBsAg基因,经酶切、连接、转化,利用HBsAg基因替换p30基因,构建pcDNA3-HBsAg-ROP2重组质粒;经HindⅢ和KpnⅠ双酶切,将HBsAg-ROP2片段与pEGFP-N1真核表达载体相连,构建pEGFP-N1-HBsAg-ROP2重组表达质粒,转染HEK293T细胞,观察其蛋白表达水平.结果 HBsAg片段PCR产物约700 bp,与理论值相符;构建pcDNA3-HBsAg-ROP2重组质粒,双酶切电泳后得到约5.4 kb和1.9 kb的两条带,与预期结果相符.pEGFP-N1-HBsAg-ROP2双酶切后产生约4.7 kb和1.9 kb的条带,经测序鉴定,与GenBank发表的序列同源性为99.84%.目的基因已成功转染入HEK293T细胞中,且正确表达,蛋白浓度为3.08 mg/ml.结论 成功构建pEGFP-N1-HBsAg-ROP2重组表达质粒,转染HEK293T细胞能正确表达.
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